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原文传递对称型聚偏二氟乙烯微滤膜的用途及蛋白免疫印迹方法

专利名称：	对称型聚偏二氟乙烯微滤膜的用途及蛋白免疫印迹方法
摘要：	本发明提供一种双诱导方法制备得到的对称型聚偏二氟乙烯微滤膜作为蛋白免疫印迹的固相载体的用途；双诱导方法包括：低温环境中进行诱导及蒸汽诱导处理；再结合凝固浴处理得到的膜孔均匀的对称型聚偏二氟乙烯微滤膜。还提供一种蛋白免疫印迹方法。本发明中低温冷诱导将亚稳态铸膜液变为非稳态，大量的结晶形成核点，而随着蒸汽诱导时间延长，晶体生长，预凝胶状态的膜浸入凝固浴中，得到具有束状/棒状结晶的均匀孔结构无皮层PVDF膜，从而大幅度的提高了PVDF膜的孔隙率，进而增加了PVDF膜的真实蛋白质结合能力，在应用于蛋白免疫印迹的固相载体作为转印膜时，赋予了PVDF膜极高的检测灵敏度，特别是在短时快速转印的应用场景中，检测效果的提升尤为显著。
专利类型：	发明专利
申请人：	迈博瑞生物膜技术(南通)有限公司;麦博睿新材料科技(重庆)有限公司
发明人：	张小明;赵新振;熊青山
专利状态：	有效
申请日期：	2023-09-01T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-17T00:00:00+0800
申请号：	CN202311128058.X
公开号：	CN117074665A
代理机构：	重庆渝之知识产权代理有限公司
代理人：	彭周
分类号：	G01N33/545;G01N33/543;B01J20/26;B01D71/34;B01D61/14;G;B;G01;B01;G01N;B01J;B01D;G01N33;B01J20;B01D71;B01D61;G01N33/545;G01N33/543;B01J20/26;B01D71/34;B01D61/14
申请人地址：	226010 江苏省南通市南通经济技术开发区宏兴东路3号3号楼;
主权项：	1.一种双诱导方法制备得到的对称型聚偏二氟乙烯微滤膜作为蛋白免疫印迹的固相载体的用途；所述双诱导方法包括以下步骤： S1、将聚偏二氟乙烯溶于溶剂中并加入添加剂混合均匀得到铸膜液； S2、将铸膜液制备形成液态膜； S3、将液态膜置于0℃～30℃的低温环境中进行诱导10秒～120秒至预凝胶状态为止，然后送至恒温恒湿环境中进行蒸汽诱导处理；所述恒温恒湿环境的温度为20℃～50℃、相对湿度为50RH％～100RH％； S4、将蒸汽诱导处理后的液态膜置于凝固浴中得到凝胶膜，清洗并干燥得到膜孔均匀的对称型聚偏二氟乙烯微滤膜。 2.根据权利要求1所述对称型聚偏二氟乙烯微滤膜作为蛋白免疫印迹的固相载体的用途，其特征在于：所述双诱导方法制备得到的所述对称型聚偏二氟乙烯微滤膜在短时快速的蛋白免疫印迹过程中作为固相载体对微克级别含量的蛋白样本进行检测的用途。 3.根据权利要求1所述对称型聚偏二氟乙烯微滤膜作为蛋白免疫印迹的固相载体的用途，其特征在于：所述溶剂包括N，N-二甲基乙酰胺、N，N-甲基甲酰胺、N-甲基-2-吡咯烷酮、磷酸三乙酯、2-吡咯烷酮中的一种或多种。 4.根据权利要求1或2或3所述对称型聚偏二氟乙烯微滤膜作为蛋白免疫印迹的固相载体的用途，其特征在于，所述铸膜液中各原料的质量分数为：聚偏二氟乙烯10wt％～30wt％、溶剂50wt％～60wt％～90wt％、添加剂为0wt％～40wt％。 5.根据权利要求4任一项所述对称型聚偏二氟乙烯微滤膜作为蛋白免疫印迹的固相载体的用途，其特征在于：所述添加剂包括添加剂一和/或添加剂二；所述添加剂一包括甲醇、乙醇、甘油、异丙醇、正丁醇、二甘醇、三甘醇、四甘醇、水中的一种或多种，和/或，所述添加剂二包括聚乙烯吡咯烷酮、聚(2-乙基-2-噁唑啉)、乙烯基吡咯烷酮-乙酸乙烯酯共聚物中的一种；所述添加剂一的质量分数为0wt％～20wt％，和/或，所述添加剂二的质量分数为0wt％～20wt％。 6.根据权利要求1或2或3所述对称型聚偏二氟乙烯微滤膜作为蛋白免疫印迹的固相载体的用途，其特征在于：所述步骤S3中低温环境温度为0℃～25℃，诱导时间为10～90秒。 7.根据权利要求1或2或3所述对称型聚偏二氟乙烯微滤膜作为蛋白免疫印迹的固相载体的用途，其特征在于：所述步骤S1中聚偏二氟乙烯、溶剂、添加剂混合的温度为50℃～90℃。 8.根据权利要求1或2或3所述对称型聚偏二氟乙烯微滤膜作为蛋白免疫印迹的固相载体的用途，其特征在于：所述恒温恒湿环境的温度为20℃～40℃、相对湿度为70RH％～100RH％。 9.根据权利要求1或2或3所述对称型聚偏二氟乙烯微滤膜作为蛋白免疫印迹的固相载体的用途，其特征在于：所述凝固浴的温度为20～70℃，处理时间为2～10min；和/或，所述步骤S4中清洗的时间为5～20min；和/或，所述步骤S4中干燥的时间为1～10min，所述干燥的温度为50～90℃。 10.一种蛋白免疫印迹方法，其特征在于，包括：将蛋白样品在固相载体上进行电泳分离并转印，最后通过抗原抗体反应进行检测和分析，所述固相载体为具有权利要求1～9任一项所述用途的所述对称型聚偏二氟乙烯微滤膜。