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原文传递 基于量子点基础上的免疫组化分析检测方法
专利名称: 基于量子点基础上的免疫组化分析检测方法
摘要: 一种纳米材料领域的基于量子点基础上的免疫组化分析检测方法,包括如下 步骤:(1)首先将量子点分散在硼酸盐缓冲溶液中,然后加入硫化二亚胺和二抗, 混合,反应,离心,洗涤,得到量子点标记的二抗复合物;其中,量子点:硫化 二亚胺:二抗摩尔比为60∶15∶1;或者(2)首先将量子点分散在含有体积分数 为1.25%的戊二醛的磷酸缓冲溶液中,分散,反应,加入二抗,反应,离心,洗 涤,得到量子点标记的二抗复合物;其中,量子点∶戊二醛∶二抗摩尔比为60∶ 15∶1;之后按照标准免疫组化检测方法进行免疫反应和观察。本发明的方法用 荧光显微镜直接进行观察判断,简单易行,荧光光稳定性增加,分析的准确度和 检测的灵敏度有所提高。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 上海;31
申请人: 上海交通大学
发明人: 贺 蓉;崔大祥;高 峰;徐 昕
专利状态: 有效
申请日期: 2009-05-07T00:00:00+0800
发布日期: 2019-01-01T00:00:00+0800
申请号: CN200910050748.1
公开号: CN101551387
代理机构: 上海交达专利事务所
代理人: 王锡麟;王桂忠
分类号: G01N33/536(2006.01)I
申请人地址: 200240上海市闵行区东川路800号
主权项: 1、一种基于量子点基础上的免疫组化分析检测方法,其特征在于,包括如 下步骤: 步骤一,将表面带有羧基或氨基的水溶性量子点与二抗连接, (1)如果是表面带有羧基的水溶性量子点,则首先将量子点分散在硼酸盐 缓冲溶液中,然后加入硫化二亚胺和二抗,混合,25℃下反应3小时,离心,洗 涤,得到量子点标记的二抗复合物; 其中,量子点∶硫化二亚胺∶二抗的摩尔比为60∶15∶1; (2)如果是表面带有氨基的水溶性量子点,则首先将量子点分散在含有体 积分数为1.25%的戊二醛的磷酸缓冲溶液中,超声使之完全分散,25℃下摇床活 化反应3小时,加入二抗,在4℃下反应24小时,离心,洗涤,得到量子点标记的 二抗复合物; 其中,量子点∶戊二醛∶二抗的摩尔比为60∶15∶1; 步骤二,将切片标本先放入二甲苯中脱腊2次,然后置入无水乙醇中梯度水 化,水洗,过氧化氢灭活内源性过氧化氢酶,微波抗原修复,水洗后用正常山羊 非免疫血清封闭,滴加一抗,4℃反应过夜,磷酸缓冲溶液洗后加入量子点标记 的二抗复合物,避光条件下37℃反应30~60分钟,磷酸缓冲溶液漂洗,甘油封片; 磷酸缓冲溶液代替一抗作为阴性对照,在荧光显微镜下观察样本。
所属类别: 发明专利
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