专利名称: |
一种定量检测硫代氧化型辅酶(Thio-NAD)的循环酶检测方法和试剂盒 |
摘要: |
本发明公开了一种定量检测硫代氧化型辅酶(Thio-NAD)的循环酶检测方法,包括:配制pH8.5-10.50Tris-HCl缓冲液,其中含有一定量的辅酶I(NADH)、脱氧胆酸钠溶液、3α-羟类固醇脱氢酶(3α-HSD)、海藻糖,加入含有Thio-NAD的待测样品。3α-HSD将胆酸钠或脱氧胆酸钠脱氢氧化形成3α-酮类固醇,同时将Thio-NAD还原成还原型硫代辅酶(Thio-NADH);在溶液中NADH的存在下,3α-HSD可将3α-酮类固醇重新还原成胆酸钠或其衍生物,同时将NADH脱氢氧化成NAD+。反应中生成的Thio-NADH在405nm处有最大吸收,通过测定37℃反应一段时间后特定波长下溶液的吸光度值,计算出待物中Thio-NAD的含量。该法绿色环保、测定试剂稳定,特别适合Thio-NAD的批量检测。 |
专利类型: |
发明专利 |
国家地区组织代码: |
浙江;33 |
申请人: |
浙江夸克生物科技有限公司 |
发明人: |
商纯尔;陈青松 |
专利状态: |
有效 |
申请日期: |
2011-09-30T00:00:00+0800 |
发布日期: |
2019-01-01T00:00:00+0800 |
申请号: |
CN201110298422.8 |
公开号: |
CN102507463A |
代理机构: |
杭州宇信知识产权代理事务所(普通合伙) 33231 |
代理人: |
张宇娟 |
分类号: |
G01N21/31(2006.01)I |
申请人地址: |
312500 浙江省绍兴市新昌县高新技术产业园区 |
主权项: |
一种定量检测硫代氧化型辅酶(Thio?NAD)的循环酶检测方法,其特征在于:配制pH8.5?10.50Tris?HCl缓冲液,其中含有一定量的辅酶I(NADH)、脱氧胆酸钠、3α?羟类固醇脱氢酶(3α?HSD)、海藻糖,加入含Thio?NAD的待测样品,反应中生成的Thio?NADH在405nm处有最大吸收,通过测定37℃反应一段时间后特定波长下溶液的吸光度值,计算出待测样品中Thio?NAD的含量。 |
所属类别: |
发明专利 |