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原文传递 一种定量检测硫代氧化型辅酶(Thio-NAD)的循环酶检测方法和试剂盒
专利名称: 一种定量检测硫代氧化型辅酶(Thio-NAD)的循环酶检测方法和试剂盒
摘要: 本发明公开了一种定量检测硫代氧化型辅酶(Thio-NAD)的循环酶检测方法,包括:配制pH8.5-10.50Tris-HCl缓冲液,其中含有一定量的辅酶I(NADH)、脱氧胆酸钠溶液、3α-羟类固醇脱氢酶(3α-HSD)、海藻糖,加入含有Thio-NAD的待测样品。3α-HSD将胆酸钠或脱氧胆酸钠脱氢氧化形成3α-酮类固醇,同时将Thio-NAD还原成还原型硫代辅酶(Thio-NADH);在溶液中NADH的存在下,3α-HSD可将3α-酮类固醇重新还原成胆酸钠或其衍生物,同时将NADH脱氢氧化成NAD+。反应中生成的Thio-NADH在405nm处有最大吸收,通过测定37℃反应一段时间后特定波长下溶液的吸光度值,计算出待物中Thio-NAD的含量。该法绿色环保、测定试剂稳定,特别适合Thio-NAD的批量检测。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 浙江;33
申请人: 浙江夸克生物科技有限公司
发明人: 商纯尔;陈青松
专利状态: 有效
申请日期: 2011-09-30T00:00:00+0800
发布日期: 2019-01-01T00:00:00+0800
申请号: CN201110298422.8
公开号: CN102507463A
代理机构: 杭州宇信知识产权代理事务所(普通合伙) 33231
代理人: 张宇娟
分类号: G01N21/31(2006.01)I
申请人地址: 312500 浙江省绍兴市新昌县高新技术产业园区
主权项: 一种定量检测硫代氧化型辅酶(Thio?NAD)的循环酶检测方法,其特征在于:配制pH8.5?10.50Tris?HCl缓冲液,其中含有一定量的辅酶I(NADH)、脱氧胆酸钠、3α?羟类固醇脱氢酶(3α?HSD)、海藻糖,加入含Thio?NAD的待测样品,反应中生成的Thio?NADH在405nm处有最大吸收,通过测定37℃反应一段时间后特定波长下溶液的吸光度值,计算出待测样品中Thio?NAD的含量。
所属类别: 发明专利
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