专利名称: |
一种双核铀酰配合物在ATP分析中的应用 |
摘要: |
本发明公开了一种双核铀酰配合物在ATP分析中的应用,属于生物化学分析检测方法技术领域。包括以下步骤:确定检测ATP的最优条件;配制BUIPTP检测底液;绘制测定ATP的标准曲线;样品中ATP含量的分析:称取含有ATP的待测样品,加水溶解或稀释,并加入Tris‑HCl缓冲液;在搅拌下将BUIPTP检测底液滴加到上述溶液中;在最佳波长处测定二级散射光谱强度。利用本发明所提供的检测方法检测的ATP的浓度,与客观浓度的偏差小于2.5%,本发明所提出的检测方法具有很高的精准度;在ATP的浓度低至0.75nmol·L‑1时本发明仍能检出,在2.5‑500nmol·L‑1范围内具有良好的检测效果。 |
专利类型: |
发明专利 |
国家地区组织代码: |
湖南;43 |
申请人: |
南华大学 |
发明人: |
肖锡林;许丽;蒋敏;廖力夫;王娇;彭鹏程 |
专利状态: |
有效 |
发布日期: |
2019-01-01T00:00:00+0800 |
申请号: |
CN201810574952.2 |
公开号: |
CN108776113A |
代理机构: |
西安铭泽知识产权代理事务所(普通合伙) 61223 |
代理人: |
俞晓明 |
分类号: |
G01N21/31(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N21;G01N21/31;G01N21/64 |
申请人地址: |
421001 湖南省衡阳市常胜西路28号 |
主权项: |
1.一种双核铀酰配合物在ATP分析中的应用,其特征在于,所述双核铀酰配合物为BUIPTP,该应用包括以下步骤:步骤1,确定检测ATP的最优条件:1‑1,在比色管中加入已知浓度的ATP溶液得到待测ATP溶液;1‑2,配制BUIPTP检测底液;1‑3,配制标准品溶液:在搅拌下将BUIPTP检测底液滴加到待测ATP溶液中,得到ATP标准溶液;1‑4,用荧光分光光度计测定不同激发波长下ATP标准溶液二级散射光谱强度,确定检测ATP的最佳波长;1‑5,配制不同pH的缓冲溶液,将不同pH的缓冲溶液加入ATP标准溶液中,在最佳波长下测定体系二级散射光谱,确定检测ATP的最佳pH;1‑6,将ATP标准溶液孵育0‑50min,在最佳波长及pH条件下测定二级散射光谱,确定检测ATP的最佳孵育时间;1‑7,在最优条件下,检测不同浓度的ATP的二级散射光谱;步骤2,绘制测定ATP的标准曲线:以ATP的浓度为横坐标,以二级散射光强度为纵坐标绘制测定ATP的标准曲线;步骤3,样品中ATP含量的分析:3‑1,称取含有ATP的待测样品,加水溶解或稀释,并加入缓冲液以达到最佳pH,得到待测样品溶液;3‑2,在搅拌下将BUIPTP检测底液滴加到待测样品溶液中,得到标准品溶液,孵育0‑50min;3‑3,在最佳波长处测定孵育后的标准品溶液的二级散射光谱强度;3‑4,从标准曲线中查找出所述样品中的ATP浓度,并计算出样品中的ATP含量。 |
所属类别: |
发明专利 |