详情

原文传递一种食品中米酵菌酸的检测方法及其应用

专利名称：	一种食品中米酵菌酸的检测方法及其应用
摘要：	本发明的目的在于提供一种食品中米酵菌酸的检测方法及其应用，其检测方法包括如下步骤：1）制备米酵菌酸人工抗原：将米酵菌酸与载体蛋白偶联，制备米酵菌酸包被原和米酵菌酸免疫原；2）制备抗米酵菌酸的多克隆抗体：制备米酵菌酸免疫原对应的多克隆抗体；3）多克隆抗体特异性及灵敏度检测：包括酶标板的制备、抗体的制备、标准溶液的配制以及结果评价；本发明通过米酵菌酸与载体蛋白偶联制备了全抗原，并通过动物免疫成功制备了抗BA多克隆抗体。通过评价，本发明制备的抗原/抗体的性能完全能满足现场对米酵菌酸进行快速筛查的需求。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	广东省疾病预防控制中心
发明人：	龙朝阳;黄伟雄;李斌;方磊;许秀敏;黄智永;石松;任季玉
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-15T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-26T00:00:00+0800
申请号：	CN201910300576.2
公开号：	CN110058008A
代理机构：	广州专理知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	谭昉
分类号：	G01N33/53(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	511430 广东省广州市番禺区大石群贤路160号
主权项：	1.一种食品中米酵菌酸的检测方法，其特征在于，包括如下步骤： 1）制备米酵菌酸人工抗原：将米酵菌酸与载体蛋白偶联，制备米酵菌酸包被原和米酵菌酸免疫原； 2）制备抗米酵菌酸的多克隆抗体：通过动物免疫制备多克隆抗体； 3）多克隆抗体特异性及灵敏度检测：包括酶标板的制备、抗体的制备、标准溶液的配制以及检测结果评价。 2.由权利要求1所述的食品中米酵菌酸的检测方法，其特征在于，步骤1）中将米酵菌酸与载体蛋白偶联，保留米酵菌酸结构上的三个羧酸基团，制备得到具有母环结构的米酵菌酸人工抗原。 3.由权利要求1或2所述的食品中米酵菌酸的检测方法，其特征在于，步骤1）制备米酵菌酸人工抗原包括如下步骤：1a）将米酵菌酸溶解于氢溴酸中，振荡混匀之后用氢氧化钠调节酸碱度，即得到A液；1b）将载体蛋白、NHS溶于超纯水中，充分溶解后，冰浴条件下加入EDC，之后移除冰浴升温至室温、并振荡，最后加入CB缓冲液搅拌均匀，即得到B液；1c）将A液加入B液中，搅拌24h以上，用PBS溶液进行透析，收集透析液。 4.由权利要求3所述的食品中米酵菌酸的检测方法，其特征在于，所述载体蛋白包括牛血清白蛋白、卵清蛋白、人血清白蛋白以及血蓝蛋白的任意一种。 5.由权利要求1所述的食品中米酵菌酸的检测方法，其特征在于，免疫原的载体蛋白为血蓝蛋白，包被原的载体蛋白为牛血清白蛋白。 6.由权利要求3所述的食品中米酵菌酸的检测方法，其特征在于，步骤1a中酸碱度pH为7~8。 7.由权利要求3所述的食品中米酵菌酸的检测方法，其特征在于，CB缓冲液的pH为9.6，PBS溶液pH为7.2。 8.一种权利要求1至7任一项所述的食品中米酵菌酸的检测方法的应用，其特征在于，该检测方法应用于对食品中米酵菌酸的快速筛查。
所属类别：	发明专利