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原文传递一种蛋白质分子印迹光学和电化学传感器的制备方法

专利名称：	一种蛋白质分子印迹光学和电化学传感器的制备方法
摘要：	本发明提供了一种蛋白质分子印迹光学和电化学传感器的制备方法。首先用3‑氨基丙基三乙氧基硅烷对裸碳电极进行表面处理引入氨基。将引入氨基的裸碳电极浸泡到模板蛋白质、海藻酸钠和羧基化石墨烯的混合水溶液中，再将涂覆混合水溶液的裸碳电极浸泡在氯化钙水溶液中交联，用缓冲溶液将模板蛋白质洗脱掉，吸附引入银离子并经过还原得到表面含银纳米离子的蛋白质分子印迹光学和电化学传感器。本发明制备的可识别蛋白质的分子印迹杂化水凝胶修饰电极可以同时用于表面增强拉曼光谱的光学传感器和电化学传感器，从而大大提高检测的效率及可靠性，在蛋白质分析检测领域具有良好的应用前景。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	天津;12
申请人：	天津工业大学
发明人：	赵孔银;郭智龙;藺塬聖;薛涛;杨正春;余俊民;易新准;洪乙丹;王会才
专利状态：	有效
申请日期：	2021-11-24T00:00:00+0800
发布日期：	2022-03-01T00:00:00+0800
申请号：	CN202111398821.1
公开号：	CN114113253A
分类号：	G01N27/30;G01N27/327;G01N21/65;G;G01;G01N;G01N27;G01N21;G01N27/30;G01N27/327;G01N21/65
申请人地址：	300387 天津市西青区宾水西道399号
主权项：	1.一种蛋白质分子印迹光学和电化学传感器的制备方法，其特征是包括以下步骤： a)将清洗干净后的裸碳电极浸泡到质量百分比为0.01％-2％的3-氨基丙基三乙氧基硅烷水溶液中2-24小时，在裸碳电极表面引入氨基； b)配制蛋白质质量百分比浓度为0.01％-5％，海藻酸钠质量百分比浓度为0.1％-5％，硅酸钠质量百分比浓度为0.01％-2％，羧基化石墨烯质量百分比浓度为0.01％-10％的混合物水溶液，静置消泡放置于无菌容器中备用； c)配制氯化钙质量百分比浓度为0.1％-10％的氯化钙水溶液； d)将步骤b)得到的混合物水溶液，均匀地涂覆在步骤a)得到的表面引入氨基的裸碳电极上，利用氨基与海藻酸钠及羧基化石墨烯上的羧基之间的相互作用使海藻酸钠分子及羧基化石墨烯组合在裸碳电极表面；立即将涂覆步骤b)得到的混合物水溶液的裸碳电极浸泡到步骤c)得到的氯化钙水溶液中0.5-24小时，得到含蛋白质的杂化水凝胶修饰电极；氯化钙交联硅酸钠，在该杂化水凝胶中生成均匀分散的硅酸钙纳米粒子； e)将步骤d)得到的含蛋白质的杂化水凝胶修饰电极用洗脱液洗脱掉蛋白质，然后浸泡到硝酸银水溶液中吸附银离子，随后用硼氢化钠水溶液还原，得到表面含银纳米粒子的可识别蛋白质的分子印迹杂化水凝胶修饰电极；以该修饰电极作为工作电极，银电极作为参比电极，铂片作为辅助电极，组装成为可快速检测识别蛋白质的电化学传感器；将拉曼光谱仪的探头与可识别蛋白质的分子印迹杂化水凝胶修饰电极组合，成为可快速检测识别蛋白质的光学传感器； f)将步骤e)得到的可识别蛋白质的分子印迹杂化水凝胶修饰电极置于蛋白质的水溶液中吸附蛋白质后取出，使用拉曼光谱仪检测吸附的蛋白质，由于步骤e)得到的杂化水凝胶中的银纳米粒子可作为增强基底的活性热点，极大地提高了蛋白质的检测灵敏度；本发明制备的可识别蛋白质的分子印迹杂化水凝胶修饰电极可同时用于表面增强拉曼光谱的光学传感器和电化学传感器，从而大大提高了检测限、可靠性和检测效率，该蛋白质分子印迹光学和电化学传感器在蛋白质分析检测领域具有良好的应用前景； g)本发明制备过程中没有引入有毒有害试剂，没有聚合反应热引起蛋白质构象的变化，洗脱蛋白质的过程温和，得到的可识别蛋白质的分子印迹水凝胶修饰电极生物相容性好，识别性能高。 2.如权利要求1所述一种蛋白质分子印迹光学和电化学传感器的制备方法，其特征是所述的蛋白质为牛血清蛋白、卵清蛋白、过氧化氢酶、溶菌酶中的任意一种或两种以上混合物。 3.如权利要求1所述一种蛋白质分子印迹光学和电化学传感器的制备方法，其特征是所述的洗脱液为磷酸盐缓冲溶液、Tris-HCl缓冲溶液、醋酸缓冲溶液中的任意一种。
所属类别：	发明专利