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原文传递一种人血浆中美托洛尔浓度定量分析方法

专利名称：	一种人血浆中美托洛尔浓度定量分析方法
摘要：	本发明公开了一种人血浆中美托洛尔浓度定量分析方法，采用液相二级质谱LC‑MS/MS联用仪检测，所述高效液相色谱条件为：色谱柱为Welch XB‑C18色谱柱，流动相A为体积分数为0.09‑0.11％甲酸水溶液，流动相B为甲醇，流速为0.4‑0.6mL/min，柱温为30‑60℃，进行梯度洗脱。本发明灵敏度高，准确度高。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	安徽;34
申请人：	合肥科颖医药科技有限公司
发明人：	汪潇;范颖;汪峻
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-09T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-16T00:00:00+0800
申请号：	CN201910281006.3
公开号：	CN110018251A
代理机构：	合肥市长远专利代理事务所(普通合伙)
代理人：	段晓微
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	230000 安徽省合肥市蜀山区蜀山新产业园蜀峰路558号融智科技园3号楼1010室
主权项：	1.一种人血浆中美托洛尔浓度定量分析方法，其特征在于，采用液相二级质谱LC-MS/MS联用仪检测，所述高效液相色谱条件为：色谱柱为Welch XB-C18色谱柱，流动相A为体积分数为0.09-0.11％甲酸水溶液，流动相B为甲醇，流速为0.4-0.6mL/min，柱温为30-60℃，进行梯度洗脱，所述梯度洗脱程序为：0-0.5min内，流动相A和流动相B的体积比为100：0；0.5-3min内，流动相A和流动相B的体积比从100：0匀速渐变至0：100；3-3.5min内，流动相A和流动相B的体积比为0：100；3.5-3.51min内，流动相A和流动相B的体积比从0：100匀速渐变至100：0；3.51-5min内，流动相A和流动相B的体积比为100：0；所述质谱条件为：离子源为ESI离子源，检测方式为正离子检测，扫描方式为选择反应监测SRM，Spray Voltage为3000-3500V，Capillary Temperature为300-400℃，Sheath GasPressure为30-40 Units，Sweep Gas Pressure为10-20Units，Aux Gas Pressure为5-20Units，Collision Pressure为1.0，Scan Time为0.1-0.5S，Scan Width为0.05Da。 2.根据权利要求1所述人血浆中美托洛尔浓度定量分析方法，其特征在于，高效液相色谱条件中，色谱柱的规格为50×3.0mm，孔径为3μm。 3.根据权利要求1或2所述人血浆中美托洛尔浓度定量分析方法，其特征在于，高效液相色谱条件中，流动相A为体积分数为0.1％甲酸水溶液。 4.根据权利要求1-3任一项所述人血浆中美托洛尔浓度定量分析方法，其特征在于，高效液相色谱条件中，流速为0.5mL/min。 5.根据权利要求1-4任一项所述人血浆中美托洛尔浓度定量分析方法，其特征在于，高效液相色谱条件中，柱温为40℃。 6.根据权利要求1-5任一项所述人血浆中美托洛尔浓度定量分析方法，其特征在于，高效液相色谱条件中，进样量为2-20μL；优选地，高效液相色谱条件中，进样量为8μL。 7.根据权利要求1-6任一项所述人血浆中美托洛尔浓度定量分析方法，其特征在于，高效液相色谱条件中，进样器温度为2-8℃；优选地，高效液相色谱条件中，进样器温度为4℃。 8.根据权利要求1-7任一项所述人血浆中美托洛尔浓度定量分析方法，其特征在于，其具体步骤为：用琥珀酸美托洛尔标准品和空白人血浆配制标准曲线血浆样品，进样并绘制标准曲线获得回归方程，再配制待测血浆溶液进样，通过内标法按回归方程计算人血浆中美托洛尔的浓度。 9.根据权利要求8所述人血浆中美托洛尔浓度定量分析方法，其特征在于，内标物为1-(乙基氨基)-3-[4-(2-甲氧基乙基)苯氧基]-2-丙醇盐酸盐；优选地，待测血浆溶液的配制方法为：取待测血浆200μL于2mL离心管中，加入10μL内标工作溶液，涡旋30s，加入1200μL甲基叔丁基醚，涡旋3min，14000rpm离心15min，取上清液1000μL于96孔板中，N2下吹干，用120μL复溶液复溶，4000rpm离心10min即得；优选地，待测血浆为使用琥珀酸美托洛尔制剂后的人的全血经EDTA-K2抗凝，然后分离取血浆，于-80℃冰箱保存，临用前在室温条件下自然解冻即得；优选地，复溶液为水和甲醇体积比为1：1的混合溶液。 10.根据权利要求9所述人血浆中美托洛尔浓度定量分析方法，其特征在于，内标工作液的浓度为200ng/mL。
所属类别：	发明专利